第三B型黏多醣儲積症（MPS III B）：NAGLU基因的突變分析

本研究的目的在分析臺灣四個MPS III B家族的分子致因。聚合酶鏈反應（PCR）放大包含患者NAGLU基因各表現子（cxon）片段，經單股核酸構形多型性（SSCP）分析及異偶合（heteroduplex）分析，篩選可能帶有突變的表現子，進行DNA定序，以檢視患者的基因突變。結果發現患者773為複異型合子的突變，其表現子3上第220個胺基酸密碼的第三個位置缺失核苷酸C（660delC 突變），表現子6上第565個胺基酸密碼發生CGG→TGG的改變，及由精胺酸Arg轉變成色胺酸Trp（R565W 突變）。對偶基因專一的寡核苷酸引子（ASO）雜合的檢測試驗顯示，患者的的660delC 突變係遺傳自父親，R565W突變則遺傳自母親。患者1146為同型合子的突變，其表現子6上第626個胺基酸密碼發生CGA→TGA的改變，即由精胺酸轉變成終止密碼（R626X 突變）。此變異產生一新的限制酶Ddel切點，Ddel切割的檢測試驗顯示患者的父親為R626X 突變的異型合子。患者1362、1363兄弟皆為同型合子的突變，其表現子2上第130個胺基酸密碼發生CGC→TGC的改變，即由精胺酸轉變成半胱胺酸Cys（R130C 突變）。此核苷酸變異使限制酶Kpnl的切割點消失，Kpnl切割的檢測試驗顯示患者的母親R130C突變的異型合子。患者1377亦為同型合子的突變，其表現子2上第154個胺基酸密碼發生ATA→AGA的改變，即由異白胺酸Ilc轉變成精胺酸（1154R 突變）。此變異經誤配（mismatch）引子的PCR可產生一新的限制酶HinfI切點，HinfI切割的檢測試驗顯示，患者的父母親皆為1154R突變的異型合子。