雜環胺類化合物之分析方法開發與其生化作用機制之探討(3/3)

IQ (2-amino-3-methyl-3H-imidazo[4,5-F]quinoline)，為一種常見於食品中的雜環胺類，並被國際癌症組織列為2A級致癌物。目前已有研究證實，IQ對於動物具有致癌性，特別是在肝臟部分尤其顯著，但關於雜環胺類導致癌症的途徑仍尚未研究完畢。本實驗使用iTRAQ (同重位素相對及絕對定量)方法針對以IQ刺激不同時間長度的HepG2 cell樣品進行分析，為了增加鑑定到的蛋白質數目，搭配了不同的三種分餾方法，包含等電聚焦分級分離、鹼性逆相層析法、強陽離子交換層析法，且比較其正交性與互補性。再經由質譜進行分析，結果為三種分餾方法共鑑定到3057個蛋白質及10712個不重複胜肽，並以鹼性逆相層析法所鑑定到的數目最多。且在其中挑選出了391個差異蛋白質，並以Gene Ontology進行分類比較；並在其中又選出較具趨勢性的蛋白質分為上下調進行KEGG pathway分析，主要與ribosome, proteasome, spliceosome, Parkinson’s disease 有較大的相關性，並挑選出其中蛋白質表現下調較明顯的幾個基因(Ribosome- RPS26、RPS4X、RPL37A、RPS24，Parkinson’s disease-SLC25A4、NDUFA8)以qPCR實驗驗證，其中以RPS26、RPL37A趨勢與蛋白質定量結果最為相同。